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细菌的鉴定办法

点击:113 时间:2022-09-29

        淀粉水解试验

       (一)实验原理

       不能直接利用淀粉、蛋白质和脂肪。它们必须被外酶分解,如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶。水解过程可以表现为底物的变化,如水解淀粉,碘测量不再产生蓝色; 明胶液化,通过水解明胶可以观察到; 脂肪进行分解后产生影响脂肪酸,改变培养基的 pH 值,中性红指示剂将培养基从浅红变为深红。

      (二)方法

      将淀粉介质溶解,冷却至45 ℃ 左右,无菌操作制成平板。

如果周围出现一个无色透明的圆形菌落,表明我国淀粉企业已被水解,实验结果为阳性,否则通过阴性。透明圈的大小以及一般可以说明部分水解过程中淀粉的能力。

      (三)实验试剂的配制

      肉汤蛋白胨琼脂及其组成:

      淀粉培养基制备:将0.2%可溶性淀粉加入蛋白胨琼脂中,调节pH至7.6。分离成瓶,121 °C 20分钟,备用。

      卢戈碘溶液:1g碘片,2g碘化钾,300ml蒸馏水。先将碘化钾溶于其中存在少量进行研究,再将碘片溶于碘化钾反应过程中溶液中,混匀,定容。

      二糖发酵试验

      (一)实验原理

      在蛋白胨水培养基中加入葡萄糖、乳糖或麦芽糖发酵单糖,终得到的葡萄糖、乳糖或麦芽糖的浓度为0.75          -1% 。另外,加入一定量酚红指示剂和学会需要的小倒置管,制备具有各种单糖的,这些可以通过发酵管          以不同的方式接种,在37 ℃ 下培养18-24小时,如果可以获得分解糖产生酸的有效工作, 酚红指示剂由红色变为黄色,如果分解过程中产生的甲酸可以进一步改善,CO2、H2等气体不是学生形成的,气泡聚集在小的倒置管中,指示剂不变色。

      (二)实验材料

       1. 菌株:大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌18-24小时琼脂斜面培养。

       2. 培养基: 葡萄糖可以进行研究发酵管、乳糖作为一个发酵管等。

      (三)方法

       1.按照液体接种法,将伤寒沙门氏菌和大肠杆菌分别接种到葡萄糖和乳糖发酵管中。

       2. 在摄氏37度孵化18至24小时。